发布日期:2024-12-22 22:45 点击次数:73
生物通报谈:细胞的内吞作用是常见的一种时势果肉系列,它所酿成的内吞体是内膜系统中的一员。在往日咱们好多期间以为这些内吞小泡仅仅起到一种物资运载的作用,跟着高通量RNAi技巧的发展东谈主们运行预防到内吞作用与信号转导间的互相考虑。 提到信号转导,那么就不得不提激酶(kinase)。在咱们的体格中有许多化学修饰作用,它们使咱们的体格发生多样变化,包括有甲基化、乙酰化、糖基化等等。在细胞周期、调一火等人命经过中还有一个紧要的修饰作用便是磷酸化,它不时起到一个开关的作用,使卵白激活或被扼制,使人命的信号一步步传递下去,激酶便是应用磷酸化功能的酶。 那么内吞作用和信号转导到底是奈何的相干呢?我在这里举一个例子:内吞作用对LDL,也便是低密度脂卵白的运载经过。
LDL颗粒运载是经典的受体介导内吞作用。LDL颗粒与质膜上LDL受体汇注会果肉系列,通过网格卵白(clathrin)包被酿成小窝(pit),随后LDL以内吞体(endosome)的花式干涉到内膜系统中进行下一步的责任。在这里网格卵白和受体齐是不错重叠利用的。 在最近Nature发表的一篇著作上对另一种卵白——窖卵白(caveolin)介导的内吞作用进行了瞩办法参谋。这项参谋胁制是由来自德国分子生物学和遗传学Max Planck参谋机构(MPI)的Lucas Pelkmans教唆的参谋小组完成的,他们还同期完成了另一项推行效力对基因组范围的激酶在内吞作用中起到作用进行了系统的参谋,瞩目信息不错看之前的报谈:Nature利用RNAi对东谈主类激酶大清点。 胞膜窖(caveolae)是1953年由Palade在电子显微镜下发现的,两年后,Yamada将其定名为Caveolae,用以态状这种细颈瓶状的细胞膜内陷。胞膜窖是细胞膜上特定的,直径约50-100nm的微区域(microdomain),富含胆固醇、鞘磷脂(sphingomyelin)和鞘糖脂(glycosphingolipids),酿成一个去垢剂不溶性的膜区域,何况以存在窖卵白分子为特征;它们也不错在细胞膜上或平铺,或管状,或酿要素离的小泡,何况交融成>100nm的结构。
A 胞膜窖在质膜上的酿成,从这个角度无法不雅察到窖卵白B 像刻上一个“卷心菜”斑纹的是包被了窖卵白的胞膜窖,右上角是包被网格卵白的内吞体 于今已克隆到窖卵白基因家眷中的三个成员:caveolin-1(两种变异体α和β),caveolin-2和caveolin-3(往日称为M-cavoelin)。在这个推行中波及到的是第一种:CAV-1。在这篇著作中主要利用了三个技巧:定量全内反荧显豁微镜(quantitative total internal reflection fluorescence microscopy, TIR-FM),电脑缓助分析和利用RNAi对基因组功能参谋。领先构建CAV-1卵白与绿色荧光卵白(GFP)在东谈主宫颈癌细胞(Hela)嵌合抒发的载体。通过对计较机对细胞内荧光散播密度进行计较,估量每单个CAV1-GFP大小为50nm。在对荧光密度进行分析时参谋东谈主员发现了一种额外奇怪的“吻完就跑”(kiss-and-run)时势。有一些胞膜窖是比拟相识的成簇散播在膜上,随时准备着进行下一步运载;关联词还有节略45%的胞膜窖是处于一种躲闪的动态均衡景色,也便是吻完就跑景色。这些胞膜窖上的鞘磷脂等要素并不会交融到膜上,它与质膜的聚会仅限于吻一下,莫得物资的疏通,然后又速即从膜上脱离。随后参谋东谈主员又利用RNAi技巧对在这个经过中所波及到的六种激酶进行了千里默。这六种激酶的作用分歧是:改革包被均衡(ARAF1),胞膜窖成簇(SRC, MGC26597),吻完就跑的动态均衡(KIAA0999,MAP3K2)和资料轮回(DYRK3)。
上图展示了胞膜窖的运载模子,参谋东谈主员归来出了三条新的规则:1 每个胞膜窖约略有144±39摩尔的CAV1卵白。2 莫得参与运载的胞膜窖约略有一半被储存在膜上,成簇的散播;而另一半则处于移时与膜聚会-分离的景色,这种吻完就跑的模式并莫得使胞膜窖和质膜进行膜的交换。3 有分子不错激活胞膜窖,使它从短途轮回变成资料轮回,干涉到内膜系统中。KIAA0999, MAP3K2和 DYRK3被以为在短途变资料中起作用,这其中波及的变化可能包括细胞骨架肌动卵白的变化和依赖微管流动性的激活这种运用到聚会了定量全内反荧显豁微镜和RNA打扰的参谋模子有助于咱们对内吞作用的考虑细节进行更深的参谋。
驯龙高手3在线观看此次Pelkmans利用RNAi技巧对东谈主类的通盘与内吞作用考虑激酶进行了参谋果肉系列,不错说是激酶组参谋界限的新坑害。当今除了基因组,咱们还有卵白质组、RNA组,靠近这个新的激酶组让我感叹万分。请络续属意翌日咱们的专题栏目:看生物·通宇宙,让咱们通盘“组”酒论铁汉(生物通记者 谢菲)。